ICS 65.020.01 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2186.4—2012 微生物农药毒理学试验准则 第4部分：细胞培养试验 Microbial pesticide toxicological test guidelines- Part 4:Cell culture study 行业标准信息服务平台 2012-06-06 发布 2012-09-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 2186.4—2012 前言 NY/T2186《微生物农药毒理学试验准则》分为以下几部分： -第1部分：急性经口毒性/致病性试验； 第2部分：急性经呼吸道毒性/致病性试验； 第3部分：急性注射毒性/致病性试验； 第4部分：细胞培养试验； 第5部分：亚慢性毒性/致病性试验； 第6部分：繁殖/生育影响试验 本部分为《微生物农药毒理学试验准则》的第4部分。 本部分按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。 本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。 本部分起草单位：农业部农药检定所。 本部分主要起草人：张丽英、陶传江、李敏、孟宇晰、闫艺舟、叶纪明。 行业标准信息服务平 I NY/T 2186. 4--2012 微生物农药毒理学试验准则 第4部分：细胞培养试验 1范围 本部分规定了细胞培养试验的基本原则、方法和要求。 本部分适用于为微生物农药登记而进行的细胞培养试验。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 病毒毒性viral toxicity 病毒损伤或破坏宿主细胞的能力，不一定同时发生病毒的复制或感染。 2. 2 病毒感染性 viral infectivity 病毒基因整合到宿主细胞基因组中的能力,或病毒基因在宿主细胞中的表达能力。 2. 3 转化transformation 病毒核酸引起的宿主细胞表型发生可检测的变化。 2. 4 最佳感染形态mostinfectious form（MIF) 病毒对易感细胞或机体发挥最大感染作用时的形态或制备物。对于非包涵体病毒，最佳感染形态 为纯化的病毒，或从感染宿主中得到的纯化组织；对于包涵体病毒（如杆状病毒、细胞质型多角体病毒、 昆虫痘病毒等），细胞培养或机体注射的最佳感染形态是从细胞培养基或感染的血淋巴中获得的胞外病 毒。通过自然途径（饲喂)感染易感昆虫宿主的最佳感染形态是病毒包涵体。 2. 5 细胞病变效应 cytopathic effects (CPE) 病毒感染引起的宿主细胞的任何损伤或破坏，包括形态学和生物化学方面的，如细胞生长、贴壁、形 态、核大小与形状、细胞生长过程(如大分子物质合成)等。 3试验目的 了解病毒类微生物农药感染哺乳动物细胞，在哺乳动物细胞内复制、转化以及产生毒性的相关信 息。 4试验方法 4.1受试物 使用最纯的MIF病毒进行试验。昆虫病毒的制备物不应含有昆虫血淋巴，除非已经确认血淋巴对 所用的细胞培养物没有毒性。应在最适宜的宿主体系中（如细胞培养物，若不可能，则用宿主机体），采 用最敏感的测试方法，进行接种体的滴定检测。在用模型体系进行试验时，对可用蚀斑法检测的病毒， 1