ICS 65.020.01 B 16 DB45 广 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 DB 45/T 1704—2018 日本方头甲室内繁殖及野外释放防治松突 圆蚧技术规程 Technical regulations for propagation indoors and field release of Cybocephalus nipponicus Endrody Yonnga against Hemiberlesia pitysophila Takagi 2018 - 04 - 20 发布 广西壮族自治区质量技术监督局 2018 - 05 - 20 实施 发 布 — DB45/T 1704 2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区林业厅提出并归口。 本标准起草单位：广西壮族自治区林业科学研究院。 本标准主要起草人：蒋学建、常明山、黄华艳、罗辑、廖旺姣、邹东霞、赵程劼、钟雅婷、邓艳、 吴耀军、陈崇征、黄乃秀、秦元丽、韦唯。 I — DB45/T 1704 2018 日本方头甲室内繁殖及野外释放防治松突圆蚧技术规程 1 范围 本标准规定了椰圆蚧[Temnaspidiotus destructor (Signoret)]的术语和定义、扩繁、日本方头甲 的室内扩繁、蛹卡的释放等。 本标准适用于广西境内日本方头甲的繁殖和野外释放防治松突圆蚧。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 松突圆蚧 Hemiberlesia pitysophila Takagi 同翅目，盾蚧科昆虫，是一种全国危险性林业有害生物。其对松树的危害损失巨大。 2.2 日本方头甲 CybocephaIus nipponicus Endrody Yonnga 鞘翅目，方头甲科昆虫，是盾蚧科的重要捕食性天敌种类。 2.3 椰圆蚧 Aspidiotus destructor Signoret 同翅目，盾蚧科昆虫，介壳直径约1.8 mm，薄、柔软、透明，与其它盾蚧相比，椰圆蚧是日本方头 甲最喜好捕食的对象，可作为大量饲养日本方头甲的饲料昆虫。 2.4 定殖 Colonization 是引入某种天敌经移植后使在新环境中能永久持续繁殖。 2.5 扩繁 Propagation 用一种可行的工艺流程，对生物进行大规模的繁殖，使之在数量上有一个大规模的增加。 3 椰圆蚧的扩繁 3.1 椰圆蚧扩繁准备 市场上购买成熟、无伤口、老熟、长度小于30 cm，直径＜15 cm的短棒型的南瓜为椰圆蚧的繁殖材 料。用自来水将南瓜表面的泥土洗净、浸泡在0.5％的高锰酸钾液中2 min后取出，用水冲洗2次，晾干。 1 — 野外采集椰圆蚧的成虫，与寄主枝条一起采回，放入28 ℃，湿度75％的人工气候箱中培养，发现有初 孵若虫立即用毛笔扫入南瓜表面进行培养；如采集到若虫，可立即用毛笔扫入南瓜表面进行培养。 DB45/T 1704 2018 3.2 椰圆蚧的扩繁 不定期观察椰圆蚧种源的发育情况，当有初孵若虫出现时，立即用毛笔将椰圆蚧的若虫扫入新的南 瓜表面，每个南瓜接种若虫1 000头，后小心地将南瓜移入28 ℃，湿度75％的人工气候箱中培养。40 d 后，南瓜表面各虫态的椰圆蚧数量达到3万只，每天观察若虫出现情况，发现若虫后，重复接虫的步骤。 3.3 注意事项 3.3.1 3.3.2 3.3.3 3.3.4 3.3.5 在购买繁殖椰圆蚧的南瓜时，宜选购新鲜的，即离收获的时间不超过 20 d。 接种椰圆蚧初孵若虫时，用毛笔的力度要轻，避免伤害若虫。 接种用的南瓜表面的水分要晾干。 椰圆蚧的蚧壳非常柔软，接有椰圆蚧的南瓜要轻拿轻放，避免南瓜之间的摩擦。 接种前应对繁殖器具用 3％石炭酸或 70％酒精消毒。 4 日本方头甲室内扩繁 4.1 扩繁前的准备工作 4.1.1 繁殖箱的制作 繁殖箱为长方体结构，由箱体、单面自粘海绵胶条、箱盖组成。箱体为长45 cm，宽30 cm，高20 cm 的木箱，木箱壁厚2 cm，单面自粘海绵胶条宽2 cm，将自粘海绵胶条粘在箱体上沿，箱盖由双层0.5 cm 厚的透明玻璃板制成，长50 cm、宽35 cm，中心留长方形的透气口，透气口的长40 cm、宽25 cm，透气口 用100目的塑料纱网封口。 4.1.2 蛹收集器的制作 蛹收集器为长45 cm，宽30 cm的长方形结构，由废报纸和1.5 cm宽的自粘魔术贴两种材料制成，将 报纸剪成长45 cm，宽30 cm的长方形，将自粘魔术贴剪成30 cm一截，后将魔术贴纵向、平行地粘在报纸 上，沾满长方形的报纸为止。 4.1.3 成虫收集笼的制作 笼由铝合金框架、玻璃和纱网构成，笼的底面和顶面是玻璃，其它四面是200目的纱网，长宽高分 别为50 cm×50 cm×60 cm。笼的四周及上部用黑布笼罩，笼的上部开一个直径为10 cm的圆形天敌收集口， 收集口上套一个漏斗，漏斗上再套一个玻璃管，用棉花密封。收集时将玻璃管置于强光下，利用日本方 头甲成虫的趋光性进行收集。 4.2 日本方头甲种源收集与保存 野外寻找受盾蚧危害的苏铁、仙人掌等，观察是否有日本方头甲，在盾蚧为害后期，用吸虫管采集 日本方头甲的成虫或幼虫，去除不健康、残缺的日本方头甲，带回室内放入8 ℃的冰箱中保存，作为种 源备用。 2 — DB45/T 1704 2018 4.3 接种 4.3.1 接种时期 南瓜接种椰圆蚧40 d后，即可接种日本方头甲。 4.3.2 接种比例和数量 每个繁殖箱放入扩繁椰圆蚧的南瓜2个，日本方头甲100只。放入南瓜之前在繁殖箱的底部放入集蛹 器一片。 4.3.3 雌雄性比 放入的日本方头甲雌雄性比为1:1。 4.4 温湿度控制 室内温度控制在28 ℃，相对湿度保持在70％～80％。 4.5 方头甲成虫的转移 日本方头甲的成虫寿命有64 d。32 d后将繁殖箱移入成虫收集笼中，打开繁殖箱盖，打开成虫收集 笼上方的灯光，1 h后，将玻璃管中的成虫移到新的放有椰圆蚧的繁殖箱中，移入数量、性比同4.3.2和 4.3.3。 4.6 蛹的收集 32 d后从繁殖箱中取出南瓜，取出蛹收集器，收集器可重叠放置。放入新的收集器于繁殖箱中，再 放回南瓜，并每天观察南瓜的情况，如有腐烂情况，立即取出，同时也要取出蛹收集器。 4.7 蛹卡制作 取出集蛹器后，将刀沿2片魔术贴结合处划开，每块30 cm长的魔术贴包含其上的日本方头甲蛹即是 一个蛹卡。除留一部分作为种源外，其余的蛹卡作为生物防治产品野外释放防治松突圆蚧或其它盾蚧类 害虫。 4.8 蛹卡的冷藏保存 将蛹卡放入8 ℃的冰箱中保存，野外应用时取出。保存时间不能超过7 d。 4.9 成虫收集与保存 将蛹卡放入成虫收集笼中，每笼放入50片，每天收集成虫，作为繁殖的种源或放入8 ℃的冰箱中保 存备用。 4.10 质量控制 4.10.1 蛹卡的质量控制 卡上蛹的数量多于50只的为合格产品。 3 — DB45/T 1704 2018 4.10.2 种源复壮 每半年野外收集一次日本方头甲，剔除不健康、残缺的，将雌雄分开保存，接种时，室内繁殖的雌 成虫种源与野外收集的雄成虫配对使用，室内繁殖的雄成虫种源与野外收集的雌成虫配对使用。 5 蛹卡的释放 5.1 释放时间 最佳的释放时间为9月上旬，此时松突圆蚧的虫口密度处于低位，而经过大半年的扩繁，日本方头 甲的数量达到最大，此时应用其防治松突圆蚧效果最佳。 5.2 防治前松突圆蚧虫口密度调查 防治前，在松突圆蚧疫区设立标准地，标准地和对照区的距离在2 km以上。在标准地和对照区内选 取样树3株，用高枝剪在样树的东西南北四个方位剪取长30 cm的松树枝条各3条，从枝条的上中下部位 各取松针20个，记录松突圆蚧的虫口数量。 5.3 释放数量 每公顷释放600个蛹卡，每年释放一次。 5.4 释放方法 释放蛹卡时，在需要防治范围内每亩随机选取40株松树，将蛹卡的一端固定在松树树干胸高处，附 有日本方头甲蛹的一面朝向树干。每批蛹卡运到释放点后应在3 d内释放完成。 5.5 防治效果调查 5.5.1 调查内容 松突圆蚧的虫口密度。防治效果用防治后的松突圆蚧的虫口密度降低来衡量。 5.5.2 调查时间 在防治后的30 d内进行。 5.5.3 调查方法 同5.2。 5.5.4 计算公式 见式（1）。 a = 式中： a——虫口减退率； b——防治前虫口数； c——防治后虫口数。 4 b-c c × 100 ..................................... (1) — DB45/T 1704 2018 5.5.5 日本方头甲在林间的定殖情况调查 在林间释放日本方头甲后，经过1个或几个繁殖世代或经过1个越冬期后，调查日本方头甲在林间的 存在情况。防治6个月后，在已释放过日本方头甲的松树上按5.2的方法采集松枝条，困成扎，带回室内 放入成虫收集笼中，如收集到日本方头甲成虫，则表明定殖成功。 5 — DB45/T 1704 2018 AA 附 录 A （资料性附录） 日本方头甲的形态特征与生物学特性 A.1 日本方头甲的形态特征 成虫：体长0.60 mm～1.0 mm，体宽0.40 mm～0.70 mm，体背黑色，有光泽。头近长方形。雌虫口 器、触角及足黄褐色，其余部分全体黑色。雄虫头部及前胸淡黄色，其余部分全体黑色。口器下口式， 下颚须6节，1～2节短小，复眼逗点形。触角棍棍状，11节。 A.1.2 卵：长椭圆形，两端略尖削，卵壳表面有均匀皱纹，乳白色，有光泽。卵长径0.40 mm～ 0.50 mm，横径0.16 mm～0.20 mm。 A.1.3 幼虫：初孵时乳白色，老熟时体色略深，头部淡褐色，其余部分为紫褐色。头部两侧位于上颚 的上方有4个侧单眼，黑色。胸、腹各节背板体壁着生有14个尖端圆钝的锥形附属物。气门旁有长的刚 毛。 A.1.4 蛹：围蛹，体长1.1 mm～1.20 mm，体宽0.7 mm～0.80 mm，体黄褐色。 A.1.5 茧：圆拱形。以白色蜡絮状物缀合而成，固着于化蛹部位上。 A.1.1 A.2 日本方头甲的生物学特性 方头甲在南宁没有明显的越冬，冬季可以看到其各个不同虫态，世代交替。当温度较低时则躲在树 皮缝、空介壳或叶背处，遇到人为干扰时刻立即爬走。当温度上升到16 ℃以上时可见方头甲成虫取食 蚧虫，当温度上升到20 ℃时，可见方头甲产卵。日本方头甲成虫口器为下口式, 寻找猎物时在植物上 迅速爬行，用下颚须在搜寻猎物，当遇到合适的考氏白盾蚧时，停下用口器不停触碰介壳，然后咬破介 壳，头和前胸即伸入介壳内咬破蚧