(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111314643.X (22)申请日 2021.11.08 (71)申请人 江苏医药职业学院 地址 224008 江苏省盐城市解 放南路283号 (72)发明人 夏伟　杜欣娜　樊伟平　赵小芳　 张虎　 (74)专利代理 机构 北京思创大成知识产权代理 有限公司 1 1614 代理人 高爽 (51)Int.Cl. C07K 14/47(2006.01) C07K 19/00(2006.01) A61K 38/17(2006.01) A61K 47/64(2017.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种靶向抑制神经母细胞瘤细胞生长的前 导肽、 融合肽 及其应用 (57)摘要 本发明属于生物医药领域， 涉及一种靶向抑 制神经母细胞瘤细胞生长的前导肽、 融合肽及其 应用。 该前导肽的氨基酸序列如SEQ  ID NO： 1所 示。 本发明通过分析ISL1蛋白入核 转运的核定位 信号氨基酸序列， 设计并合 成了抑制神经母细胞 瘤生长的前导肽， 细胞 实验证实该前导肽可以有 效抑制神经母细胞瘤细胞SK ‑N‑AS和SKNBE2的生 长。 权利要求书1页 说明书3页 序列表1页 附图1页 CN 114316014 A 2022.04.12 CN 114316014 A 1.一种靶向抑制神经母细胞瘤细胞生长的前导肽， 其特征在于， 该前导肽的氨基酸序 列如SEQ ID NO： 1所示。 2.一种靶向抑制神经母细胞瘤细胞生长的融合肽， 其特征在于， 该融合肽包括权利要 求1所述的前导肽与位于所述前导肽N端的穿膜肽。 3.根据权利要求2所述的融合肽， 其特征在于， 所述穿膜肽为TAT、 Penetratin、 Polyarginines、 DPV1047、 MPG、 Pep ‑1、 pVEC、 ARF(1 ‑22)、 BPrPr(1 ‑28)、 MAP、 Transportan、 p28、 VT5、 Bac  7(Bac 1‑24)、 C105Y、 PFVYLI或Pep‑7。 4.根据权利要求3所述的融合肽， 其特征在于， 所述穿膜肽为TAT， 所述融合肽的序列如 SEQ ID NO： 2所示。 5.权利要求1所述的前导肽或权利要求2 ‑4中任意一项所述的融合肽在制备神经母细 胞瘤细胞生长抑制剂中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用， 其中， 所述神经母细胞瘤细胞为SK ‑N‑AS细胞和/或 SKNBE2细胞。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114316014 A 2一种靶向抑制神经 母细胞瘤细胞生长的前导肽、 融合肽及其 应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药领域， 具体地， 涉及一种靶向抑制神经母细胞瘤  细胞生长的 前导肽、 融合肽 及其应用。 背景技术 [0002]神经母细胞瘤(Neuroblastoma， NB)常发于婴幼儿时期， 在儿童恶性  肿瘤中所占 的比例为8％～10％左右， 每年的发病率在0.3/10万至0.5/10万  之间， 成为仅次于急性白 血病和中枢神经恶性肿瘤的一种高度恶性颅外实  体肿瘤， 80％左右的儿童NB发生在5岁之 前。 NB主要起源于肾上腺组织、  神经鞘、 颈部、 胸腔和腹膜交感神经节， 具有发病隐蔽性、 高 恶性、 高侵  袭转移和病程进 展迅速等特点。 临床上尚缺乏靶向治疗药物。 发明内容 [0003]本发明的目的是提供一种靶向抑制神经母细胞瘤细胞生长 的前导肽和  融合肽， 该前导肽和融合肽可以显著抑制神经母细胞瘤 细胞的生长 。 [0004]发明人挖掘基因编辑敲除文库筛选肿瘤细胞生长依赖基因数据， 发现  ISL1(ISL   LIM Homeobox  1， ISL1)基因可以特异性促进神经母细胞瘤细  胞的生长， 提示ISL1基因可 能作为靶向抑制神经母细胞瘤生长的潜在靶点。  基于此， 完成本发明。 [0005]本发明的第一方面提供一种靶向抑制神经母细胞瘤细胞生长 的前导 肽， 该前导 肽的氨基酸序列如SEQ  ID NO： 1所示。 [0006]MGDPPKKKRLISL(SEQ ID NO： 1) [0007]本发明的第二方面提供一种靶向抑制神经母细胞瘤细胞生长 的融合 肽， 该融合 肽包括所述前导肽与位于所述前导肽N端的穿膜肽。 [0008]本发明中的所述穿膜肽可以为本领域常规的各种穿膜肽， 包括但不限  于： TAT、 Penetratin、 Polyarginines、 DPV1047、 MPG、 Pep ‑1、 pVEC、 ARF(1 ‑22)、 BPrPr(1‑28)、 MAP、 Transpor tan、 p28、 VT5、 Bac  7(Bac 1‑24)、 C105Y、 PFVYLI 或Pep‑7。 [0009]优选地， 所述 穿膜肽为TAT， 所述融合肽的序列如SEQ  ID NO： 2所示。 [0010]RKKRRQRRR‑MGDPPKKKRLISL(SEQ ID NO： 2) [0011]本发明的前导肽和融合肽可以通过本领域常规的方法合成。 [0012]本发明还提供前导肽或融合肽在制 备神经母细胞瘤细胞生长抑制剂中  的应用。 具体地， 所述神经母细胞瘤 细胞为SK ‑N‑AS细胞和/或SKNBE2  细胞。 [0013]ISL1基因是一个蛋白编码基因， 编码蛋白主要定位于细胞核。 本发明  通过分析 ISL1蛋白入核转运的核定位信号氨基酸序列， 设计并合成了抑制  神经母细胞瘤生长的前 导肽， 细胞实验证实该 前导肽可以有效抑制神经母  细胞瘤细胞SK‑N‑AS和SKNBE2的生长 。 [0014]本发明的其它特 征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。说　明　书 1/3 页 3 CN 114316014 A 3