ICS 65.020.01 B16 DB35 福 建 省 地 方 标 准 DB35/T 1560—2016 柚实雷瘿蚊检疫鉴定方法 Technical Standard for Quarantine and Identification of Resseliella citrifrugis Jiang 2016 - 04 - 06 发布 2016 - 07 - 06 实施 福建省质量技术监督局 发 布 福 建 省 地 方 标 准 柚实雷瘿蚊检疫鉴定方法 DB35/T 1560—2016 * 2016 年 10 月第一版 2016 年 10 月第一次印刷 DB35/T 1560—2016 前 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 言 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写。 本标准由中华人民共和国福建出入境检验检疫局提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国福州出入境检验检疫局、中华人民共和国福建出入境检验检疫局、 福建农林大学。 本标准主要起草人：陈智明、侯有明、李敏、陈艳、虞赟。 I DB35/T 1560—2016 柚实雷瘿蚊检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了柚实雷瘿蚊的分类地位、鉴定原理、仪器与试剂、现场检疫方法、室内检疫和结果 判定等。 本标准适用于柑橘类苗木和果实中柚实雷瘿蚊的检疫鉴定。 2 分类地位 中文名：柚实雷瘿蚊 学名：Resseliella citrifrugis Jiang 分类地位：双翅目(Diptera)，瘿蚊科(Cecidomyiidae)，Resseliella属 3 原理 柚实雷瘿蚊的形态特征、传播途径、生物学特征及受害果特征，为柚实雷瘿蚊的检疫鉴定提供 依据。 4 仪器设备 4.1 体视显微镜、显微镜、放大镜 4.2 解剖针、昆虫针、培养皿、吸管、小毛笔 4.3 人工气候箱 5 主要试剂 5.1 乙醇溶液：浓度 75%。 5.2 甲醛溶液：40%甲醛 1 份加 19 份蒸馏水，摇匀。 6 6.1 现场检疫 抽查 1 DB35/T 1560—2016 在柑橘类果实和带土种苗出入境时现场进行。抽查方法要视装载的柑橘类果实种类而定，抽查 数量按总量的 20%～50%抽取，最低抽取 10 件且总量不少于 500 枚，达不到此数量的全部检查。种 苗可采用随机法进行，以开顶集装装运的成树要逐株进行查验根土。 6.2 取样 现场取样与抽样同步进行。发现危害状应进一步观察，发现有活的害虫为害迹象时送实验室培 养。 6.3 检疫方法 6.3.1 现场检疫 在现场用放大镜对出入境柑橘类果实和带土苗木进行仔细检查，柑橘类果实，根据柚实雷瘿蚊 的取食特性，如有可疑，带回实验室在体视显微镜下仔细观察分离，若是带土苗木则取根系土回实 验室利用盐水漂浮法对土中的虫卵、蛹、幼虫进行分离。根据该虫的为害习性，重点加强对跨年柑 橘类果实的植物的检疫。同时亦要注意对集装箱、外包装纸箱等装载容器进行检查，对现场检疫发 现的各种虫态害虫用镊子或毛笔收集，以指形管保存(必要时幼虫用 75%乙醇保存液浸泡)，加贴标 签，带回实验室鉴定。 6.3.2 取样检疫 发现有可疑虫卵、幼虫和蛹的柑橘类果实或者带土苗木，应将寄主一并取样，及时安全地送往 实验室检疫，经室内饲养至成虫再做种类鉴定。 7 室内检疫 7.1 检疫方法 将取回的样品放在白瓷盘上，用现场检疫同样的方法对取回的样品进行认真检疫，有为害斑果 实要重点检查卵，检查时需注意卵的体形较小，色泽与受害寄主相似，多位于成虫取食后的食痕内。 柑橘类苗木根系土中经常藏匿柚实雷瘿蚊幼虫和蛹，应利用盐水漂浮法仔细查找。 7.1.1 饲养检疫 室内发现有可疑柚实雷瘿蚊卵、幼虫和蛹等未成熟虫态，要饲养成成虫再做进一步鉴定。 7.1.2 显微镜检疫 样品特别是卵和低龄幼虫等虫态的观察，肉眼较难发现，需借助体视显微镜观察，现场取样的 成虫、幼虫和蛹也要用体视显微镜进行鉴定。 7.2 2 鉴定特征 DB35/T 1560—2016 7.2.1 成虫 体淡红色，密被黑色微毛。雌虫体长 2.0 mm～3.0 mm，翅展 3.5 mm～4.0 mm，腹部褐红色， 圆筒形；雄虫体形较雌虫略小，体长 1.8 mm～2.0 mm，翅展 2.6 mm～3.5 mm。复眼黑色，占头的大 部。触角 14 节，串珠状，基部第 1～2 节短而结合紧密，第 3～13 节每节基部呈筒状，端部为柄状， 每节有 2 圈刚毛，第 l4 节圆锥形。雌虫、雄虫触角异型：雄虫亚鞭节哑铃形，较长且弯曲；雌虫亚 鞭节圆筒形，约为体长的 1/2。中胸发达。静止时双翅重叠于腹背并超过腹末，翅外缘呈反“3”字 形或弧形。前翅呈卵形，基部收缩。翅膜质，仅具纵脉 3 条，被黑色细毛，组成明显的斑点和条纹， 翅面较宽，在阳光下有金属光泽。足细长, 并呈黑黄相间的斑纹，第 1 跗节短于第 2 跗节，前足跗 爪齿简单。外生殖器亦明显有异：产卵管细长外露, 长 0.6 mm～1.2 mm，套环状。交配器内的一对 抱握器明显，抱握器长 0.2 mm～0.3 mm，向内弯曲。 7.2.2 卵 长椭圆形、微小，两端钝圆，卵表光滑，长 3.1 mm～4.3 mm。初呈白色半透明，后乳白色至淡 褐色，孵化前卵内出现红色点状。刚孵化时卵中间出现黄红色斑点。 7.2.3 幼虫 初孵时白色透明，肉眼难以察觉。成熟时幼虫体长 5 mm，13 节，呈纺锤状,红色。头壳较短， 胸部有三角形红色斑点，末端有 4 个突起，中胸腹板有一黑褐色倒“Y”状剑骨片，是弹跳的器官； 腹部有浅黄斑。末节端部有两对微形突起。 7.2.4 蛹 长约 3.0 mm～4.0 mm，宽 0.5 mm～0.8 mm，长纺锤形，体初期淡红色，近羽化时呈褐色。蛹壳 浅白色，为被蛹。外被黄褐色丝茧。头顶具分叉的额刺 1 对；腹部 9 节，翅芽及足均黑褐色。雌蛹 足达腹部第 5 节。雄蛹足较长，达腹部第 6 节。 8 结果判定 以成虫形态特征为依据，完全符合 7.2.1 描述的形态特征可以确定为柚实雷瘿蚊。卵、幼虫、 蛹的形态特征为参考。 3 DB35/T 1560—2016 附 录 A （资料性附录） 柚实雷瘿蚊形态特征图 Ａ.1 柚实雷瘿蚊形态特征见图 A.1。 1——成虫； 2——雌性外生殖器； 3——雄性外生殖器； 4——卵； 5——幼虫； 6——蛹。 图 A.1 柚实雷瘿蚊的形态特征 4 DB35/T 1560—2016 Ａ.2 柚实雷瘿蚊成虫见图 A.2。 图A.2 柚实雷瘿蚊成虫（♀） Ａ.3 柚实雷瘿蚊四龄幼虫见图 A.3。 图A.3 柚实雷瘿蚊四龄幼虫 5 DB35/T 1560—2016 附 录 B （资料性附录） 柚实雷瘿蚊为害图 B.1 柚实雷瘿蚊为害导致的落果见图B.1。 图B.1 柚实雷瘿蚊为害导致的落果 B.1 柚实雷瘿蚊为害的琯溪蜜柚见图B.2。 图B.2 柚实雷瘿蚊为害的琯溪蜜柚 6 DB35/T 1560—2016 柚实雷瘿蚊的寄主为柑橘类果实，主要为害柚和桔类，该害虫以老熟幼虫或蛹在土壤中越冬， 以成虫产卵于果蒂附近，造成蛆柚，为害果实，幼虫孵化后蛀食柚果的白皮层，果皮受害后产生流 胶，随着幼虫虫龄的增长，为害亦加重，最后导致柚果发黄、霉烂、未熟先落。沙田柚园遭受柚实 雷瘿蚊为害后，一般受害株率在 30%～50%，严重的达到 80%以上，严重降低了柚果的产量和品质。 该虫老熟幼虫和蛹可随果品及苗木（在土中过冬的老熟幼虫和蛹）运输而传播蔓延。 柚实雷瘿蚊幼虫通常分为四个龄期，见表 B.1： 表 B.1 柚实雷瘿蚊幼虫特征 虫龄 体长(mm) 体色 形状 中胸腹面剑骨片 胸腹部斑点 1龄 0.3～1.5 白 扁平两端尖 不明显 不明显 2龄 1.3～2.5 黄红 纺锤形 略现 略现 3龄 2.4～3.5 黄红 纺锤形 明显 红褐色短条 4龄 3.3～3.9 红褐 扁纺锤形 明显 三角红斑 7 DB35/T 1560—2016 附 录 C （资料性附录） 柚实雷瘿蚊实验室饲养 C.1 柚实雷瘿蚊养虫笼见图C.1。 图C.1 养虫笼 C.2 柚实雷瘿蚊的沙土中羽化见图C.2。 图C.2 柚实雷瘿蚊的沙土中羽化 8