ICS 11.120.10 CCS C 271 团体标准 T/GDPA 11— 2021 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐含量 及有关物质检测 Determination of content and impu rity of β -Triphosphopyridine nucleotide disodiu m salt 2021-6-25 发布 2021-6-25 实施 广东省药学会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/GDPA 11—2021 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本 文件起草单位： 中山百灵生物技术股份 有限公司、中山百盛生物技术有限公司、中山俊凯生物技 术开发有限公司、安徽先和研究开发有限公司、中山安士生物制药有限公司。 本文件主要 起草人：娄良、张和平、郭然、梁待亮、钟义华、秦和平、罗素芗 。 本文件的 发布机构提请注意，声明符合本文件时， 可能涉及到《一种β -NADP二钠盐含量及有关物 质的测定方法》（ CN105866270B ）相关的专利 的使用。 本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场。 该专利 持有人已向本文件的发布机构承诺，愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下， 就专利授权许可进行谈判。该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案。相关信息可以通过以下 联系方式获得： 专利持 有人姓名：中山百灵生物技术股份 有限公司。 地址：广东 省中山市火炬开发区九洲大道 28号。 请注意除上述专利外， 本文件的某些内容仍可能涉及专利。本文件的 发布机构不承担识别专利的 责任。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/GDPA 11—2021 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐含量及有关物质检测 1 范围 本文件规定了β-烟酰 胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐的含量测定及有关物质检测方法。 本文件适用于β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐的质量控制。 2 规范性引用文件 下列文件中 的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适 用于本文件。 中华人民共 和国药典（2020 年版四部） 通则 0301、 0402、051 2、0631 CN105866270B 一种β-NADP二钠盐含量及有关物质的测定方法 3 术语和定义 下列术语和 定义适用于本文件。 3.1 β -烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐 β -Triphosphopyridine nucleotide disodium salt 简称β-NADP二钠盐， 化学式为 C21H26N7Na2O17P3，其化学结构式 见图 1。 POPO OOO OOO OHOHNNH2O OOHOP OOHO NN NNH2N NaNa 图1 β-NADP二钠盐的化学结构式 1 全国团体标准信息平台 T/GDPA 11—2021 3.2 供试品 te st articles 系指待鉴别、待测定的供测试样品。 3.3 对照品 reference standards 指采用理化方法进行鉴别、检查或含量测定时所用的标准物质，其特性量值一般按纯度（% ）计。 3.4 有关物质 related substances 指药品在生产过程中带入的起始原料、 中间体、 聚合体、 副反应产物以及贮藏过程中的降解产物等。 4 产品要求 本品为β-NADP二钠 盐，按无水、无溶剂物计算，含 C21H26N7Na2O17P3不得少于98. 0%。 5 检测方法 5.1 仪器与 试剂 5.1.1 试剂材料 β-NADP二钠盐样品； β-NADP二钠盐对照品； β-烟酸酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）对照品；三磷酸 腺苷酸（ATP ）对照品；二磷酸腺苷酸（ADP ）对照品；磷酸（色谱纯）；三羟甲基氨基甲烷（色谱纯）； 水（重蒸馏水）。 5.1.2 溶液配制 β-NADP二钠盐对照品溶液：取β -NADP二钠盐对照品适量，精密称定，加流动相制成每 1mL含0.5mg 的溶液。 杂质对照品溶液：取β -烟酸酰胺腺嘌呤二核苷酸（ NAD）对照品约25 mg，置100ml容量瓶中，加流动 相溶解并定容至刻度，摇匀，即得杂质对照溶液a ；取约三磷酸腺苷酸（ ATP）对照品25mg ，置100ml容 2 全国团体标准信息平台 T/GDPA 11—2021 量瓶中， 加流动相溶解并定容至刻度， 摇匀， 即得杂质对照溶液 b； 取二磷酸腺苷酸 （ ADP）对 照 品约25mg， 置100ml容量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀，即得杂质对照溶液 c。 混合杂质对照品溶液：取杂质对照溶液 a 2ml、杂质对照溶液 b 1ml、杂质对照溶液 c 1ml，置同一 个100ml容量瓶中，加流动相 定量稀释 制成每1ml分别含NAD 5μg、含ATP 2.5μg、含ADP 2.5μg的混合溶 液。 供试品溶液：取 β-NADP二钠盐样品适量，精密称定，加流动相 制成每1ml约含0.5mg的溶液。 系统适用性 溶液：分别取杂质对照溶液a 、b、c各2ml，置同一个 10ml的容量瓶中， 用流动相定量 稀 释制成每1ml中含各杂质对照均为0.05mg 的混合溶液。 5.1.3 仪器设备 高效液相色谱仪（配紫外检测器 ）；电子分析天平（ 分度值不大于 0.1mg）。 5.1.4 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（ 4.6 mm×150 mm ，5μm或效能相当的色谱柱）；以含0.6% 三 羟甲基氨基甲烷水溶液（用磷酸调节 pH值至 4.0）为流动相；检测波长 为260nm；进样体积为20μl 。 5.2 检查 5.2.1 性状 β-NADP二钠盐样品，应为白色或类白色粉末或结晶性粉末，有引湿性；在水中易溶，在乙醇中几 乎不溶。 5.2.2 鉴别 5.2.2. 1 按高效液相色谱法 （中国药典 2020年版四部通则 0512）测定，在6.2项下记录的色谱图中， β- NADP二钠盐供 试品溶液主峰 的保留时间应与 β-NADP二钠盐对照品溶液主峰的保留时间一致。 5.2.2.2 按红外分光光度法（中国药典 2020年版四部通则 0402）测定，β-NADP二钠盐样品的红外光吸 收图谱应与 β-NADP二钠盐对照品的图谱一致。 5.2.2.3 按一般鉴别试验（中国药典 2020年版四部通则 0301）测定，β-NADP二钠盐样品显钠盐鉴别 反应。 3 全国团体标准信息平台 T/GDPA 11—2021 5.2.3 pH 值 取 β-NADP二钠盐样品，加水溶解并稀释制成每 1ml中约含20mg的溶液，按pH 值测定法（中国药典 2020版通则0631 ）测定，pH 值范围应为8.0~9.0 。 6 含量测定 6.1 色谱条件与系统适用性试验 同5.1.4。理论板数按 β-NADP二钠盐峰计算应不低于 2500。 6.2 测定法 分别精密 吸取β -NADP二钠盐供试品溶液与 β-NADP二钠盐对照品溶液各20 μl，注入液相色谱仪，记 录色谱图。按外标法以峰面积计算。含 C21H26N7Na2O17P3不得少于 98.0%。 7 有关物质检测 7.1 色谱条件与系统适用性试验 同6.1。 7.2 测定法 精密量取β -NADP二钠盐供试品溶液100μ l与杂质对照品溶液10μ l，分别注入液相色谱仪，记录β - NADP二钠盐供试品色谱图及杂质对照品色谱图中NAD 、ATP、ADP的峰面积。β -NADP二钠盐供试品 溶液色谱图中如有与 NAD、 ATP、ADP保留时间相同的色谱峰，按外标法分别以峰面积计算，含 NAD、 ADP、ATP分别各不超过1.0% 、0.5%、0.5%。 __________ _______________________ 4 全国团体标准信息平台