ICS 67.120.30 B 50 T/ZACA 团体标 准 T/ZACA 024—2020 水产品中镇静剂类药物残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法 Determination of sedative residues in aquatic products by liquid chromatography -tandem mass spectrometry 2020 - 01 - 13发布 2020 - 01 - 19实施 浙江省质量合格评定协会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ZACA 024 —2020 I 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 原理 .............................................................................. 1 4 试剂和材料 ........................................................................ 1 5 仪器 .............................................................................. 2 6 分析步骤 .......................................................................... 2 7 结果计算和表述 .................................................................... 4 8 精密度 ............................................................................ 5 9 准确度 ............................................................................ 5 10 灵敏度 ........................................................................... 5 附录A（资料性附录） 13种镇静剂类化合物标准品的中文名称、英文 名称、CAS登录号、分子式、相 对分子量 ............................................................................. 6 附录B（资料性附录） 13种化合物多反应监测（ MRM）质谱图（ 20 μg/L） .................. 7 全国团体标准信息平台 T/ZACA 024 —2020 II 前 言 本标准依据 GB/T 1.1 —2009规定的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由浙江省质量合格评定协会提出并 归口。 本标准主要起草单位：绿城农科检测技术有限公司。 本标准参与起草单位： 浙江省农业科学院农产品质量标准研究所、浙江省水产质量检测中心、 湖州 市农畜水产品检测中心、丽水蓝城农科检测技术有限公司 。 本标准主要起草人：何晓明 、余鹏飞、 章舒祺、杨鲁琼、 洪琳、郭利攀、贝亦江 、徐杰、沈东强、 朱萌萌、周婷婷、 卢军、陈志民、黄梅 英。 本标准为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/ZACA 024 —2020 1 水产品中镇静剂类药物残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法 1 范围 本标准规定了水产品中13 种镇静剂类药物残留量的液相色谱- 串联质谱测定方法。 本标准适用于鱼、虾、蟹、贝 4类水产品中 13种镇静剂类药物残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 SC/T 3016 水产品抽样方法 3 原理 用乙腈提取试样中的镇静剂类药物，然后 用QuEChERS 吸附剂净化提取液，用液相色谱- 串联质谱 仪测定，外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有说明， 本方法所用试剂均为 分析纯，水为 GB/T 6682规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 乙腈（C2H3N）：色谱纯。 4.1.2 甲醇（CH4O）：色谱纯。 4.1.3 甲酸铵（CH 5NO2）：色谱纯。 4.1.4 甲酸（CH2O2）：色谱纯。 4.1.5 无水硫酸钠 （Na 2SO4）：500 ℃灼烧 4 h，置于干燥器内备用。 4.1.6 N-丙基乙二胺吸附剂（ PSA）：40 μ m～60 μm粒径范围， 100 Å平均孔径。 4.1.7 十八烷基键合硅胶吸附剂（C18 ）：40 μ m～60 μm粒径范围， 60 Å 平均孔径。 4.1.8 微孔滤膜： 0.22 μm，尼龙膜。 4.2 试剂配制 4.2.1 50 %甲醇 -水溶液：量取 50 mL甲醇（4.1.2）于 100 mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。 4.2.2 甲酸铵溶液（2 mmol/L）：称取甲酸铵（ 4.1.3）0.126 g （精确至 0.001 g），置于 1000 mL 容量瓶中，加少量水溶解后，用水定容至刻度，摇匀备用。 全国团体标准信息平台 T/ZACA 024 —2020 2 4.2.3 0.1 %甲酸-2 mmol/L 甲酸铵溶液：准确吸取甲酸（4.1.4） 1 mL，置于1000 mL容量瓶中，加 甲酸铵溶液（4. 2.2）定容至刻度，摇匀，过滤。 4.2.4 0.1 %甲酸-甲醇溶液：准确吸取甲酸（ 4.1.4）1 mL，置于1000 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻 度，摇匀备用。 4.2.5 QuEChERS 离心管：准确称取 100 mg PSA（ 4.1.6）、40 mg C18 （4.1.7）和 500 mg无水硫酸钠 （4.1.5），储存于 15 mL具螺旋盖聚丙烯离心管中，旋紧盖塞，置于干燥器内备用。 4.3 标准品 13种标准品的中文名称、英文名称、CAS 登录号、分子式、相对分子量见附录A 表A.1，纯度均 ≥ 95%。 4.4 标准溶液配制 4.4.1 标准储备溶液：分别准确称取标准品（4.3 ）100.0 mg（精确至 0.0001 g），用甲醇溶解并定 容至100 mL，此溶液浓度均为 1 mg/mL。 4 ℃避光密封保存，有效期 6个月。 4.4.2 混合标准中间 溶液：取 1 mL 13种镇静剂类药物标准储备溶液（ 4.4.1）用甲醇定容至 100 mL， 配制成10 µg/mL的混合标准中间溶液，4 ℃避光密封保存，有效期 1个月。 4.4.3 空白基质溶液：称取空白试样，按照 6.2规定的样品预处理方法操作制备。 4.4.4 基质混合标准溶液：用空白基质溶液（4.4.3 ）将混合标准 中间溶液（4.4.2）稀释成适合浓度 的基质混合标准溶液，现配现用。 5 仪器 5.1 液相色谱- 串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI ）。 5.2 分析天平：感量 0.1 mg和0.01 g。 5.3 离心机：转速不低于 8000 r/min。 5.4 涡旋振荡器。 5.5 超声波清洗器。 5.6 氮吹浓缩仪 。 5.7 均质机。 6 分析步骤 6.1 试样制备 按SC/T 3016 的规定执行。 6.2 试样前处理 6.2.1 提取 取试样，常温自然解冻后，称取 5.0 g试样（精确至 0.01g）于 50 mL离心管中， 准确加入 20 mL 乙 腈（4.1.1）， 5 g无水硫酸钠（4.1.5） ，涡旋混匀 1 min后，超声提取 10 min， 8000 r/min 离心 5 min， 上清液转至另一 50 mL离心管中；残渣中再准确 加入 20 mL乙腈重复提取一次，合并两次上清液。 全国团体标准信息平台 T/ZACA 024 —2020 3 6.2.2 净化 准确量取 提取液 4 mL置于QuEChERS 离心管（4.2.5 ）中，剧烈振荡 1 min，8000 r/min离心5 min ， 移取全部上清液于10 mL 试管中，于40 ℃下氮吹至近干， 加入1 mL 50 % 甲醇-水溶液 （4.2.1） 溶解残渣， 过0.22 μm 微孔滤膜（4.1.8 ），供液相色谱- 串联质谱联用仪分析 。 6.3 测定 6.3.1 液相色谱分离条