Ⅱ ICS 11.220 B 41 团体标准 T/ CVMA 4—2018 猫泛白细胞减少症诊断技术规范 Diagnostic technical specification for feline panleukopenia 2018 - 10 - 24发布 2018 - 10 - 24实施 中国兽医协会 发布 中国兽医协会 CVMAT/ CVMA 4—2018 I 目 次 前言 ................................ ................................ .................. II 1 范围 ................................ ................................ ................ 1 2 术语和定义、缩略语 ................................ ................................ ..1 3 诊断依据 ................................ ................................ ............ 1 4 诊断原则 ................................ ................................ ............ 3 5 诊断标准 ................................ ................................ ............ 3 附录A （规范性附录） 猫泛白细胞减少症病毒分离培养和鉴定方法 .......................... 4 附录B （规范性附录） 红细胞凝集试验和凝集抑制试验 ................................ ....6 附录C （资料性附录） 猫泛白细胞减少症游离抗原检测法 ................................ ..8 附录D （资料性附录） 猫泛白细胞减少症核酸检测法 ................................ .....10 附录E （资料性附录） 猫泛白细胞减少症病原学、流行病学和临床表现特点 ................. 12 中国兽医协会 CVMAT/ CVMA 4—2018 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由瑞派宠物医院管理股份有限公司提出。 本标准由中国兽医协会归口。 本标准主要起草单位：瑞派宠物医院管理股份有限公司。 本标准主要起草人：周同改。 中国兽医协会 CVMAT/ CVMA 4—2018 1 猫泛白细胞减少症诊断技术规范 1 范围 本标准规定了猫泛白细胞减少症的诊断依据、诊断原则和诊断 判定。 本标准适用于宠物诊疗机构及其兽医工作人员对猫泛白细胞减少症的诊断、报告。 2 术语和定义、缩略语 下列术语和定义、缩略语适用于本文件。 2.1 猫泛白细胞减少症 feline panleukopenia 又称猫瘟热（ feline distemper ）或猫的细小病毒病（ parvovirosis in cats ），是由细小病毒 感染引起的猫特别是幼龄猫的一种发热性、高度接触性、致死性传染病，病原包括猫 细小病毒和犬细小 病毒。 2.2 FPLV Feline panleukopenia virus ，猫泛白细胞减少症病毒 2.3 FPV Feline parvovirus ，猫细小病毒 2.4 CPV Canine parvovirus ，犬细小病毒 2.5 CPV–2 Canine parvovirus type 2 ，犬细小病毒 2型 2.6 CPV–2a Canine parvovirus type 2a ，犬细小病毒 2a型 2.7 CPV–2b 中国兽医协会 CVMAT/ CVMA 4—2018 2 Canine parvovirus type 2b ，犬细小病毒 2b型 2.8 CPV–2c Canine parvovirus type 2c ，犬细小病毒 2c型 2.9 F81 Feline kidney cell line F81 ，猫肾细胞系 2.10 HA Hemagglutination test ，血凝试验 2.11 HI Hemagglutination inhibition test ，血凝抑制试验 2.12 ELISA Enzyme linked immunosorbent assay ，酶联免疫吸附试验 2.13 PCR Polymerase chain reaction ，聚合酶链反应 3 诊断依据 3.1 流行病学史 未免疫、免疫不全、免疫失败或者 免疫抑制的猫，尤其幼猫和群居猫易感。 病患及隐性携带者可经体液、粪便及污染物直接感染猫，也可通过用具、垫料及人、跳蚤、苍蝇等 作为媒介传播病原。 3.2 临床表现 3.2.1 本病临床症状严重程度视个体差异较大，从无症状感染到轻度发热再到严重的急性特征，甚至 12小时之内的猝死。发热、呕吐、腹泻是急性感染的三个典型症状。 ——发热：急性病例早期表现发热，在潜伏期 2d～7d后出现， 直肠温度高达 40℃以上，精神沉郁，厌 食，活力下降。 ——呕吐：经常在发热开始后 1d～2d出现呕吐。即便未进食也可能出现 呕吐，属典型的胆汁型呕吐。 ——腹泻：腹泻可能略 有延迟，也不是一直出现。腹泻严重时呈水样或血便。 3.2.2 随着病程的进一步加重，出现脱水、消瘦、胃肠道积液积气、腹部触诊疼痛等。 中国兽医协会 CVMAT/ CVMA 4—2018 3 3.2.3 子宫感染早期会出现死胎、 流产或重吸收； 怀孕晚期或新生仔猫感染引起 “猫共济失调综合征” ， 出现辨距不良、四肢外展和震颤摇摆。 3.3 病理变化 3.3.1 小肠水肿增厚、充血、出血，严重的呈伪膜性炎症变化，肠上皮细胞脱落，肠绒毛萎缩，小肠 后段有灰红或黄绿色纤维素性坏死性假膜或条索，内容物灰黄色、水样、恶臭。 3.3.2 肠系膜淋巴结肿大、充血、出血，呈红白灰相间的大理石样花纹。 3.3.3 感染胚胎或新生仔猫小脑发育不全。 3.3.4 多数病例的 长骨骨髓变为液体或半液体。 3.3.5 病程在3d～4d以内的患猫，其肠管上皮细胞可见嗜酸性和嗜碱性两种包涵体。 3.4 外周血象 白细胞计数明显减少，通常会在 2000个/µL～4000个/µL以下，其中嗜中性粒细胞减少症和淋巴细 胞减少症多发，也会出现贫血和血小板减少症。 3.5 实验室检测 3.5.1 猫泛白细胞减少症病毒分离培养并鉴定为阳性，具体操作参见附录 A。 3.5.2 血凝试验阳性，并被已知猫泛白细胞减少症病毒免疫血清抑制血凝，操作参见附录 B。 3.5.3 粪便中猫泛白细胞减少症病毒游离抗原检测阳性，操作参见附录 C。 3.5.4 猫泛白细胞减少症病毒核酸检测阳性，操作参见 附录D。 4 诊断原则 猫泛白细胞减少症病例的诊断是以病原学检查为主，结合流行病学史、临床表现、病理变化和外周 血象等进行综合分析做出诊断。流行病学史和临床表现是该病诊断的重要依据，但不是必要条件，病理 变化和外周血象也只是辅助诊断依据。病例确诊需严格的病原学检测证据。 5 诊断判定 5.1 猫泛白细胞减少症疑似病例 具备3.2与3.3中的任何一项或 3.1、3.4者，且无其它明确诊断的胃肠炎、幼猫神经症状或成猫流产 的病例。 5.2 猫泛白细胞减少症确诊病例 具备3.5中任何一项的猫泛白细胞减少症疑似病例。 5.3 猫泛白细胞减少症排除病例 同时具备以下两项的，可排除猫泛白细胞减少症： ——患猫粪便泛白细胞减少症病毒游离抗原检测阴性（ 3.5.3），且病毒分离阴性（ 3.5.1）或病毒 核酸检测阴性（ 3.5.4），并经至少两个公司检测试剂或实验室所证实。 ——死亡患猫无法进行血象检测，尸检组织病毒分离阴性（ 3.5.1）或病毒抗原（ 3.5.3）及核酸检 测阴性者（ 3.5.4），并经至少两个公司检测试剂或实验室所证实。 中国兽医协会 CVMAT/ CVMA 4—2018 4 附 录 A （规范性附录） 猫泛白细胞减少症病毒分离培养和鉴定方法 A.1 猫泛白细胞减少症病毒的分离培养 A.1.1 实验材料 F81细胞、肉汤培养基、 MEM粉、青霉素、链霉 素、胎牛血清、 Na2HPO4·12H2O 、KH2PO4 、NaCl、 KCl、NaOH、2%磷钨酸。 A.1.2 培养基和试剂的准备 A.1.2.1 肉汤培养基 将蛋白胨 10g、牛肉膏 5g、氯化钠 5g溶解于1000mL蒸馏水中，调节 pH至7.2～7.4，分装， 121℃高压 灭菌20min备用。 A.1.2.2 0.01 mol/L PBS 将Na2